產(chǎn)品介紹：

　本品是由一款新型高效的快速DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR穩(wěn)定劑和增強(qiáng)劑組成的預(yù)混體系，濃度為2×。本產(chǎn)品為康為世紀(jì)新型快速DNA聚合酶，具有*的擴(kuò)增速度與穩(wěn)定性，延伸速度可達(dá)5 s/kb，最短十五分鐘完成PCR，長(zhǎng)片段（大于3 kb）或者復(fù)雜模板可以采用10-30 s/kb的延伸速度或者較多循環(huán)數(shù)。MasterMix配方使整個(gè)反應(yīng)體系非常穩(wěn)定，同時(shí)復(fù)雜模板也能得到有效擴(kuò)增，超過(guò)98%的PCR擴(kuò)增能一次成功。使用時(shí)只需要加入DNA模板和引物，補(bǔ)足水即可反應(yīng)，可最大限度地減少人為誤差、降低污染和節(jié)約時(shí)間。

  本產(chǎn)品已加入染料（藍(lán)色），反應(yīng)結(jié)束后可直接進(jìn)行電泳檢測(cè)。擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物3′端附有一個(gè)“A"堿基，因此可直接用于T/A克隆，并適用于康為無(wú)縫克隆試劑盒（CW3034）、T4連接試劑盒（CW0805）和感受態(tài)產(chǎn)品（CW0812）。

 本產(chǎn)品主要適用于超快PCR、復(fù)雜模板、復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)、對(duì)高保真性有要求的基因克隆等實(shí)驗(yàn)和大規(guī)?；驒z測(cè)。

產(chǎn)品名稱：康為世紀(jì) 2×Flash MasterMix含染料PCR預(yù)混

產(chǎn)品貨號(hào)：CW3009H

質(zhì)量控制：

　經(jīng)檢驗(yàn)無(wú)外源核酸酶活性；PCR方法檢測(cè)無(wú)宿主殘余DNA；能有效地?cái)U(kuò)增多種基因組中的單拷貝基因。

使用說(shuō)明：

　以下舉例為以人基因組DNA為模板，擴(kuò)增1 kb的片段的PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)條件，實(shí)際操作中應(yīng)根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進(jìn)行相應(yīng)的改進(jìn)和優(yōu)化。

實(shí)驗(yàn)設(shè)定：

1.模板DNA量設(shè)定：

模板過(guò)量可能導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增或smear。50 μl PCR反應(yīng)體系中模板DNA推薦使

用量如下：

-人基因組DNA 5 ng-500 ng

-大腸桿菌基因組DNA 50 pg-100 ng

-質(zhì)粒DNA 10 pg-1 ng

2.引物濃度設(shè)定：

引物濃度可設(shè)為0.1 μM-1.0 μM之間。引物濃度過(guò)低時(shí)可能導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物少。引物濃度過(guò)高會(huì)抑制特異性擴(kuò)增，可能導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增。

3.退火溫度設(shè)定：

一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引物的熔解溫度Tm低5℃，無(wú)法得到理想的擴(kuò)增效率

時(shí)可適當(dāng)降低退火溫度；發(fā)生非特異性反應(yīng)時(shí)可適當(dāng)提高退火溫度。對(duì)于復(fù)雜模

板，需要調(diào)節(jié)退火溫度實(shí)現(xiàn)高效擴(kuò)增。

4.延伸時(shí)間設(shè)定：

延伸時(shí)間應(yīng)根據(jù)所擴(kuò)增片段大小設(shè)定。以下為推薦的延伸時(shí)間：

質(zhì)粒等簡(jiǎn)單模板：5-15 s/kb；

常規(guī)基因組、cDNA模板：10-15 s/kb；

復(fù)雜模板、粗提模板：20-30 s/kb；

（延伸時(shí)間不宜過(guò)短應(yīng)至少在5 s/kb以上，也不宜超過(guò)30 s/kb）。

5.循環(huán)數(shù)設(shè)定：

可根據(jù)擴(kuò)增產(chǎn)物的下游應(yīng)用設(shè)定循環(huán)數(shù)。如果循環(huán)次數(shù)太少，擴(kuò)增量不足；如果

循環(huán)次數(shù)太多，錯(cuò)配機(jī)率會(huì)增加，非特異性背景嚴(yán)重。所以在保證產(chǎn)物得率的前

提下應(yīng)盡量減少循環(huán)次數(shù)。

保存條件：-20℃

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

品牌             貨號(hào)                   名稱                               規(guī)格

康為世紀(jì) CW3009H  2×Flash PCR MasterMix(Dye)    40 ml

產(chǎn)品名稱：康為世紀(jì) 2×Flash MasterMix含染料PCR預(yù)混

產(chǎn)品貨號(hào)：CW3009H

關(guān)于公司：

康為世紀(jì)是主要從事高附加值、高技術(shù)含量的生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn)，為生命科學(xué)研究、基因檢測(cè)和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產(chǎn)品和服務(wù)?？禐槭兰o(jì)建立了專業(yè)化、集約化、能夠形成自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的技術(shù)創(chuàng)新體系和開放式的合作創(chuàng)新平臺(tái)，構(gòu)建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系。

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