產品名稱：MiSeq Reagent Nano Kit v2(300 Cycles)基因測序試劑盒

產品貨號：MS-103-1001

產品規(guī)格：

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大輸出: 8.5 Gb（500循環(huán)MiSeq試劑盒v2），5.1 Gb（300循環(huán)MiSeq試劑盒v2），1.2 Gb（300循環(huán)MiSeq試劑微試劑盒v2），0.850 Gb（50循環(huán)MiSeq試劑盒v2），0.5 Gb（500循環(huán)MiSeq Reagent Nano Kit v2），0.3 Gb（300循環(huán)MiSeq Reagent Nano Kit v2）

每次運行的大讀數: 高達1500萬

試劑類型: 配對末端測序，簇生成，合成測序

系統(tǒng)兼容性: 研究模式中的MiSeq，MiSeqDx，研究模式中的MiSeq FGx

技術: 測序

產品介紹：

MiSeq Reagent Kits v2啟用更多輸出以簡化每個MiSeq運行。MiSeq試劑盒v2保留了與v1試劑盒相同的預填充即用型試劑盒，但提供了改進的化學性質，可提高簇密度，縮短循環(huán)時間并提高質量（Q）分數。MiSeq Reagent Kits v2還提供微米和納米格式，適用于低輸出應用。

• 獲得更快的循環(huán)時間，更長的讀數和更高的化學成分輸出

• 與使用v1套件進行單面成像相比，雙表面成像可實現兩倍的讀數

• 使用500循環(huán)套件延長讀取長度

• 為您的應用選擇*的循環(huán)次數（50,300或500）

當與MiSeq系統(tǒng)升級結合使用時，MiSeq試劑盒v2允許雙表面成像使每個流動池的可讀空間量翻倍。MiSeq Regent Kits v2提供500周期格式，適用于長讀取長度，以及流行的50周期和300周期格式。

MiSeq Reagent Kits v2提供標準，微米和納米配置，可根據特定項目要求和可擴展的輸出水平進行調整。

查看產品配置

所有MiSeq試劑組件均采用RFID編碼，并與MiSeq系統(tǒng)智能交互，以驗證與用戶定義的應用程序的兼容性。

還提供MiSeq Reagent Kit v3。它提供600循環(huán)格式，允許任何Illumina測序系統(tǒng)具有長的讀取長度，或150循環(huán)格式，可實現計數應用。

產品名稱：illumina 病毒 v2基因測序試劑盒300次        產品貨號：MS-103-1001

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產品名稱：MiSeq Reagent Nano Kit v2(300 Cycles)基因測序試劑盒

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Illumina二代測序技術，邊合成邊測序（SBS），是廣泛采用的新一代測序（NGS）技術，負責產生世界上90％以上的測序數據。

Illumina的二代測序技術稱為邊合成邊測序(Sequencing-by-Synthesis,簡稱SBS)。SBS主要包括堿基延伸、熒光激發(fā)及信號收集、剪切等3個步驟。這3個步驟可以重復，循環(huán)進行。每循環(huán)一次測定一個堿基。想測定多少個堿基（即讀長），就循環(huán)多少次。測序循環(huán)次數可以在軟件里設定。到底測序多長合適，要根據項目性質和需求來決定。大多數情況下，SR實驗（單端測序）測定1x50個堿基，PE實驗（雙端測序）測定2x150個堿基。

1 堿基延伸

Illumina測序試劑里所使用的dNTP級具特色，它們同時具有兩個修飾基團：一個熒光基團，一個可逆終止基團。A、G、C、T 4種堿基分別標記4種不同的熒光基團，它們在不同波長的激光激發(fā)下，能夠發(fā)射不同波長（即顏色）的熒光。熒光顏色與堿基種類一一對應，因此根據激發(fā)光的波長可以識別堿基。4種堿基的終止基團是一樣的。由于終止基團的存在，所有dNTP每次都只能延伸1個堿基，無論給予多長的反應時間。又由于該終止基團是可逆的，在熒光信號收集完畢之后，可以用剪切劑切除該終止基團，使堿基恢復自然的可延伸狀態(tài)，這時即可繼續(xù)進行下一輪循環(huán)，再測定一個堿基。

可逆終止基團技術是Illumina二代測序的一大特色。它與橋式PCR技術一起，構成了Illumina二代測序的兩大支柱，為穩(wěn)定獲得高質量的測序數據打下了堅實的基礎。

2 信號采集

HiSeq系列測序儀具有紅綠兩根激光管，兩個濾色片。它們兩兩組合，可以形成4種不同的激發(fā)波長，正好分別用于激發(fā)A、G、C、T 4種堿基。

Cluster上所標記的熒光基團在激光激發(fā)下產生的信號，可以用相機拍攝或者掃描的方式收集信號。掃描技術速度比較快，被X10系列采用。由于FC面積比較大，而且上表面和下表面要分別拍照，所以拍照過程相當耗時。對于經典的HiSeq 2000來說，一次測序循環(huán)所產生的熒光信號，需要大約40分鐘的時間才能拍照收集完畢，時間比測序反應本身還要長。

3 剪切

熒光信號收集完畢后，關閉激光，用剪切劑去除測序引物的延伸產物上的堿基所標記的熒光基團和終止基團。兩個修飾基團均被切除，一方面消去干擾熒光，一方面使鏈末端的堿基回復到自然的可延伸狀態(tài)，為下一輪測序做好準備。

再重復合成、激發(fā)、收集等步驟，即可進行第二個堿基的測序。

測序循環(huán)可以重復多次。理論上可以一直重復，直到信噪比降低得無法有效識別堿基信號為止。由于熒光基團的發(fā)光效率持續(xù)不斷在衰減，Taq酶的活性也在持續(xù)不斷地衰減，所以實際上測序循環(huán)次數是有限的，大重復次數與sbs試劑的配方有關。測序的循環(huán)次數可以在軟件設置過程中人為，這個重復次數就是每個測序片段的讀長。目前，Illumina平臺的讀長有2x100 bp，2x125 bp，2x150 bp，2x300 bp等多種，其中2x150 bp用得zui廣泛。

單端測序：單端測序(Single-read)首先將DNA樣本進行片段化處理形成200-500bp的片段，引物序列連接到DNA片段的一端，然后末端加上接頭，將片段固定在flow cell上生成DNA簇，上機測序單端讀取序列。

雙端測序：雙端測序(Paired-end)方法是指在構建待測DNA文庫時在兩端的接頭上都加上測序引物結合位點，在di一輪測序完成后，去除di一輪測序的模板鏈，用對讀測序模塊(Paired-End Module)引導互補鏈在原位置再生和擴增，以達到第二輪測序所用的模板量，進行第二輪互補鏈的合成測序。

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