今天讓我們來了解一下重組蛋白的獲取途徑及表達系統(tǒng)分別是什么吧。
 

　　重組蛋白的產生是應用了重組DNA或重組RNA的技術從而獲得的蛋白質。體外的生產主要包括四大系統(tǒng):原核蛋白表達，哺乳動物細胞蛋白表達，酵母蛋白表達及昆蟲細胞蛋白表達。
 

　　獲得途徑：
 

　　重組蛋白需要使用表達系統(tǒng)來對其進行制備，其獲得途徑可以分為體外方法和體內方法。兩種方法的前提都是應用基因重組技術，獲得連接有可以翻譯成目的蛋白的基因片段的重組載體，之后將其轉入可以表達目的蛋白的宿主細胞從而表達特定的重組蛋白分子。
 

　　體外重組蛋白的生產主要包括四大系統(tǒng)：原核蛋白表達(常用的大腸桿菌蛋白表達)，哺乳動物細胞蛋白表達(常用的細胞CHO，HEK293)，真核表達系統(tǒng)(酵母)及昆蟲細胞蛋白表達。合適表達系統(tǒng)的選擇取決于重組蛋白的特性、預期應用以及該系統(tǒng)能否生產足夠量的蛋白質，根據(jù)自身的下游運用選擇合適的蛋白表達系統(tǒng)，提高表達成功率。
 

　　表達系統(tǒng)：
 

　　(1)目前應用廣泛的表達系統(tǒng)有三大類，大腸桿菌(Esherichia coli)表達系統(tǒng)、酵母表達系統(tǒng)、CHO細胞表達系統(tǒng)。其中，大腸桿菌是表達重組蛋白常用的宿主菌，已應用于許多具有重要藥用價值蛋白的生產。
 

　　大腸桿菌表達系統(tǒng)具有許多優(yōu)點，如生長快、培養(yǎng)成本低廉、遺傳背景清楚和易實現(xiàn)高密度培養(yǎng)等。大腸桿菌DH5α是一種誘變菌株，主要表現(xiàn)對外源DNA的免疫缺乏。大腸桿菌DH5α是基因工程常用的宿主菌之一，相比于正常菌種缺少了一定的免疫機制。
 

　　(2)不同的表達系統(tǒng)和培養(yǎng)方法顯著影響下游的處理過程，目標蛋白表達是否形成包涵體，目標蛋白表達的定位(胞內、細胞膜內、周質空間和胞外)，蛋白表達的量都依賴于所選擇的的表達系統(tǒng)。